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脂多糖提取试剂盒

LPS extraction kit
17141    100T
LipopolysaccharideLPSExtraction Kit
产品信息:(现货供应)
货号
名称
产地
规格
 
 
17141
LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒
iNtRON
100T
 
 
试剂盒组成
组分
名称
规格
保存方法
1
Lysis Buffer
1x 100 ml
2~8℃
2
Purification Buffer
1x 80ml
2~8℃
 LPS背景描述
 ◆ 脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性极高(在250℃下干热灭菌2h才完全灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
◆ 正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤,
产品描述:
◆ 最常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的热酚-水法(hot phenol-water method),主要优势在于高产量,但是提取步骤繁琐,费时,以及常受蛋白质和核酸的污染,纯度低等缺点也常困扰科研工作者。
◆ iNtRON提供的LPS提取试剂盒是市场上的第一个商品化的产品,排除传统热酚-水法的缺陷,使得科研工作者能够快速方便的从细菌中提取LPS。
产品优势:
 适用性广,能从所有G-菌中提取LPS(见Fig. 2);
 操作时间短(包括裂解在内,60min内即可完成);操作简单方便;
 少量细菌即可获得足够的LPSLPS产量与细菌培养物成正比,一般使用3~5ml培养物LPS产量最高;细菌最佳培养体积1~2mlOD600=0.8-1.2
 LPS产率高,且重复性好(见Fig.1);
 提取LPS下游应用广,包括直接用于免疫刺激;
操作步骤:
1)室温离心收获细菌细胞,13000rpm30sec
2)加入1ml裂解缓冲液(Lysis Buffer),剧烈涡旋混匀。
3)加入200μl氯仿,剧烈涡旋混匀10-20 sec,室温孵育5min
44℃,13,000rpm离心10min,转移400μl上清到新1.5ml离心管中。
5)加入800μl纯化裂解液(Purification Buffer),并混匀。-20℃孵育10min
64℃,13,000rpm离心15min
7)用1ml 70%EtOH洗涤LPS颗粒,并完全干燥。
8)在LPS中加入70μl Tris-HCL10mMpH8.0),并超声。
      脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构复杂、对热稳定;一些脂多糖是引起疾病的内毒素,它也是血清型分类的重要指标。常见的热酚或油/氯仿/苯酚的脂多糖纯化方法既复杂又费时。 LPS提取试剂盒提供了一个更少步骤、更短时间就能获得更高产量的脂多糖提取新方法,采用强大的水/酚/氯仿萃取技术,即使细菌体积<5ml也能提取出脂多糖。